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Así, el agente inhibidor del crecimiento puede ser uno que reduce significativamente el porcentaje de células en fase S. Ejemplos de agentes inhibidores del crecimiento son los agentes que bloquean la progresión del ciclo celular en un lugar distinto de la fase Diabetes 4 similar a la angiopoyetinacomo los agentes que inducen la detención G1 y la detención de Click.

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Los agentes de detención G1 también se extienden en la detención de la fase S, por ejemplo, agentes alquilantes del ADN como el tamoxifeno, prednisona, here, mecloretamina, cisplatino, metotrexato, 5-fluorouracilo, y ara-C. WB Saunders: Philadelphia,especialmente p. Pueden ser las hormonas mismas. Ejemplos de las citocinas son linfocinas, monocinas, y hormonas polipeptídicas tradicionales.

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Como se usa aquí, el término incluye proteínas de las citocinas a partir de fuentes naturales o de cultivo de células recombinantes y equivalentes biológicamente activos de las citocinas de secuencia nativa. Véase, por ejemplo, Klagsbrun y D'Amore, Annu.

Un "agente anti-angiogénesis" o "inhibidor de la angiogénesis" se refiere a sustancias de pequeño peso molecular, un polinucleótido, un polipéptido, una proteína aislada, una proteína recombinante, un anticuerpo o proteínas conjugadas o de diabetes 4 similar a la angiopoyetina de la misma, que inhibe la angiogénesis, vasculogénesis, o de la permeabilidad vascular indeseable, ya sea directa o indirectamente.

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Agentes anti-angiogénesis también incluyen los diabetes 4 similar a la angiopoyetina de la angiogénesis nativa, por ejemplo, angiostatina, endostatina, etc.

Véase, por ejemploKlagsbrun y D'Amore, Annu. La palabra "etiqueta" cuando se usa aquí, se refiere a un here o composición detectable que se conjuga directa o indirectamente con el polipéptido. La expresión "secuencias de control" se refiere a las secuencias de ADN necesarias source la expresión de una secuencia de codificación operativamente unida en un organismo huésped en particular.

Las secuencias de control que son adecuadas para los procariotas, por ejemplo, incluyen un promotor, opcionalmente, una secuencia de operador, y un sitio de unión del ribosoma. Las células eucariotas son conocidas por utilizar los promotores, las señales de poliadenilación, y potenciadores. En general, "operativamente unido" significa que las secuencias de ADN vinculadas son contiguas, y, en el caso de un líder de secreción, contiguo y en la lectura de fase. Sin embargo, los reforzadores no tienen que diabetes 4 similar a la angiopoyetina contiguos.

La vinculación es realizada mediante uniones en los sitios de restricción convenientes. Como se usa aquí, las expresiones "célula", "línea celular", y "cultivo celular" se usan indistintamente y todas estas designaciones incluyen la progenie.

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También se entiende que todos los descendientes no pueden ser exactamente idénticos en contenido de ADN, debido a las mutaciones deliberadas o inadvertidas. Kim et al.

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ANGPTL4 tiene un péptido señal, tres sitios potenciales de N-glicosilación, y cuatro cisteínas diabetes 4 similar a la angiopoyetina pueden estar implicadas en el enlace disulfuro intramolecular. Véase también, por ejemploGE et al.

Lipid Res. Regiones conservadas de la familia de la angiopoyetina incluyen un dominio super hélice y un dominio de tipo fibrinógeno C-terminal FBN. Véase, por ejemploKim et al. Véase, por ejemploGE et al.

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Véase, por ejemplo, Davis et al. Angiopoyetina 1 y 4 aparecen como un agonista del receptor Tie2, mientras angiopoyetina 2 y 3 parecen ser un antagonista y, posiblemente, un agonista para el receptor Tie2. Véase, por ejemploSolicitud de patente en EE. Camenish et al. Véase, por ejemploKoishi et al.

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Genetics Véase, por ejemploFiguras 11, 12 y Cancer Biol. Véase, por ejemplo, Friedlander, MC, et al.

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La invención proporciona composiciones de moduladores, por ejemplo, agonistas o antagonistas, diabetes 4 similar a la angiopoyetina proteínas de tipo angiopoyetina 4 ANGPTL4 y combinaciones de estos moduladores con otros agentes terapéuticos. También se proporcionan composiciones de los antagonistas de ANGPL4 y combinaciones de agentes antiangiogénicos y procedimientos para su uso en el bloqueo o la reducción de la neovascularización de las neoplasias o no neoplasias.

Por ejemplo, se puede utilizar el procedimiento descrito por el Here. Smith et al. Véase, por ejemploLe Jan et al.

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Véase tambiénFigura 7, Panel A y B. Véase, por ejemploFigura 9. Véase, por ejemploYoon et al.

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Véase, por ejemploYu et al. Lipid Res. Endocrinology R1-R6 Ver, solicitud de patente EE. Los investigadores han informado de las conexiones entre la angiogénesis y la adipogénesis. Véase, por ejemplo, Sierra-Honigmann et al. USA, 99 16 ; y Fukumura et al.

Versolicitud de patente provisional EE. Ver la sección titulada Las terapias de combinación en este documento.

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Véase también, solicitud de patente provisional EE. Como se indicó anteriormente, la invención diabetes 4 similar a la angiopoyetina terapias combinadas en el que un antagonista de ANGPTL4 se administra con otro tratamiento. El antagonista ANGPTL4 puede ser administrado en serie o en combinación con otro agente que es eficaz para esos fines, ya sea en la misma composición o en composiciones separadas. Ver también la sección titulada Composiciones diabetes 4 similar a la angiopoyetina en este documento.

Muchos agentes anti-angiogénicos han sido identificados y son conocidos en la técnica, incluidos los enumerados en la presente, por ejemplo, que figuran en las definiciones, y por, por ejemplo, Carmeliet y Jain, Nature ; Ferrara et al. Véase tambiénSolicitud de Patente EE. Una lista ejemplar y no limitativa, de agentes quimioterapéuticos se contemplan en el presente documento bajo "Definición".

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El agente anti-angiogénesis incluye a los conocidos en la técnica y los que se encuentran en las definiciones en el mismo. En una realización, el agente anti-angiogénesis es un anti-VEGF o fragmento de anticuerpos neutralizantes por ejemplo, humanizado A4. Anticuerpos de ejemplo incluyen, por ejemplo, anticuerpos policlonales, monoclonales, humanizados, fragmentos, multiespecíficos, heteroconjugados, polivalentes, función efecto, etc.

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Los anticuerpos de la invención pueden comprender anticuerpos policlonales. Procedimientos de preparación de anticuerpos policlonales son diabetes 4 similar a la angiopoyetina por el experto en la materia. Los animales son inyectados hasta las mesetas del título. Los conjugados también se pueden hacer en cultivo de células recombinantes como fusiones de proteínas.

Los anticuerpos monoclonales contra un antígeno aquí descrito se pueden hacer utilizando el procedimiento de hibridoma descrito por primera vez por Kohler et al. Alternativamente, los linfocitos pueden ser inmunizados in vitro.

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A continuación, los linfocitos se fusionan con las células de mieloma con un agente de diabetes 4 similar a la angiopoyetina adecuado, tal como polietileno glicol, para formar una célula de hibridoma Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, pp.

Las células del hibridoma así preparado se siembran y se cultivan en un medio de cultivo adecuado que normalmente contiene una o varias sustancias que inhiben el crecimiento o la supervivencia de las células de mieloma parentales no fusionadas.

Por ejemplo, si las células de mieloma parentales carecen de la enzima hipoxantina guanina fosforibosil transferasa HGPRT o HPRTel medio de cultivo para los hibridomas típicamente incluye hipoxantina, aminopterina y timidina medio HATsustancias que previenen el crecimiento de las células deficientes en HGPRT.

Las células del mieloma típicas son aquellas this web page se fusionan de manera eficiente, soportan altos niveles de producción estables de anticuerpos mediante las células productoras de anticuerpos seleccionadas, y son sensibles a un medio tal como medio HAT. Las líneas celulares de mieloma humano y de heteromieloma de ratón-humanas también se han descrito para la producción de anticuerpos monoclonales humanos Kozbor, J.

La especificidad de unión diabetes 4 similar a la angiopoyetina los anticuerpos monoclonales producidos por las células de hibridoma puede ser determinada mediante inmunoprecipitación o mediante un ensayo de unión in vitrotal como radio-inmunoensayo RIA o ensayo inmunoabsorbente enlazado con enzimas ELISA.

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Estas técnicas y ensayos son conocidos en la técnica. Los anticuerpos monoclonales pueden ser realizados mediante procedimientos de ADN recombinante, tales como los descritos en la patente US 4.

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Las células del hibridoma sirven como fuente de dicho ADN. Una vez aislado, el ADN se puede poner diabetes 4 similar a la angiopoyetina vectores de expresión, que luego se transfectan en células huésped, tales como células E.

En otra realización, los anticuerpos o fragmentos de anticuerpos pueden aislarse de las librerías de fagos de anticuerpos generados mediante las técnicas descritas en McCafferty et al. Clackson et al. Publicaciones posteriores describen la producción de anticuerpos humanos de alta afinidad rango nM barajando la cadena Marks et al. Así, estas técnicas son alternativas viables a las técnicas tradicionales de hibridoma de anticuerpo monoclonal para el aislamiento de los anticuerpos monoclonales.

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El ADN también puede modificarse, por ejemplo, mediante la sustitución de la secuencia de codificación para dominios constantes humanos de cadena pesada y ligera en lugar de secuencias homólogas murinas patente US 4.

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Típicamente, estos polipéptidos no inmunoglobulinas son sustituidos por los dominios constantes de un anticuerpo, o son sustituidos por dominios variables de un sitio de combinación de antígeno de un anticuerpo para crear un anticuerpo quimérico bivalente que comprende un sitio de combinación de antígeno que tiene la especificidad para diabetes 4 similar a la angiopoyetina antígeno y otro sitio de combinación de antígeno que tiene especificidad para un antígeno diferente.

Los anticuerpos de la invención pueden comprender anticuerpos humanizados o anticuerpos humanos.

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En consecuencia, estos anticuerpos "humanizados" son anticuerpos quiméricos patente US 4. La elección de los dominios variables humanos, tanto ligeros como pesados, para utilizarse en la fabricación de los anticuerpos humanizados es muy importante para reducir la antigenicidad.

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De acuerdo con el llamado procedimiento de "mejor ajuste", la secuencia del dominio variable de un anticuerpo de roedor se criba contra toda la librería de secuencias de dominio variables humanas conocidas. Otro procedimiento utiliza un marco particular, derivado de la secuencia de consenso de todos los anticuerpos humanos de un subgrupo particular de cadenas ligeras o pesadas.

El mismo marco puede utilizarse para varios anticuerpos humanizados diferentes Carter diabetes 4 similar a la angiopoyetina al. También es importante que los anticuerpos se humanicen con retención de alta afinidad para el antígeno y otras propiedades biológicas favorables. De esta manera, los residuos FR pueden ser seleccionados y combinados de los receptores y las secuencias de importación de modo que se consigan las características here de los anticuerpos, tales diabetes 4 similar a la angiopoyetina mayor afinidad por el antígeno s objetivo.

Alternativamente, es posible producir animales transgénicos por ejemploratones que son capaces, una vez inmunizados, de producir un repertorio completo de anticuerpos humanos en ausencia de producción de inmunoglobulinas endógenas. Por ejemplo, se ha descrito que la supresión de los anticuerpos homocigóticos del gen de la región de unión de la cadena pesada JH en ratones mutantes quiméricos y de línea germinal resulta en la inhibición completa de la producción de anticuerpos endógena.

Ver, por ejemploJakobovits et al.

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Nature Los anticuerpos humanos también pueden derivarse librerías de visualización de fagos Hoogenboom et al. Mol Biol. Nature Biotech Los anticuerpos humanos también pueden producirse utilizando diferentes técnicas conocidas en la técnica, incluidas librerías de visualización de fagos Hoogenboom y Winter, J.

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Debido a que la partícula filamentosa contiene una copia de ADN de cadena diabetes 4 similar a la angiopoyetina del genoma del fago, las selecciones basadas en las propiedades funcionales del anticuerpo también resultan en la selección del gen que codifica el anticuerpo que exhibe esas propiedades.

Así, el fago imita alguna de las propiedades de las células B. La visualización de fagos se puede realizar en una variedad de formatos, revisados en, por ejemplo, Johnson, S. D, Cur Opin Struct Biol. Varias fuentes de segmentos de genes V pueden utilizarse para la visualización de fagos.

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Por ejemplo, Clackson et al. Un repertorio de los genes V de donantes humanos no inmunizados se puede construir y anticuerpos para una amplia gama de antígenos incluyendo auto-antígenos pueden aislarse, por ejemplo, siguiendo esencialmente las técnicas descritas por Marks et al.

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Véase, tambiénlas patentes US 5. Las técnicas de Diabetes 4 similar a la angiopoyetina et al. Liss, p. Los anticuerpos humanos también pueden ser generados mediante células B activadas in vitro véase las patentes US 5. Varias técnicas han sido desarrolladas para la producción de fragmentos de anticuerpos.

Tradicionalmente, estos fragmentos fueron derivados a través de digestión proteolítica de anticuerpos intactos véase, por ejemploMorimoto et al. Sin embargo, estos fragmentos pueden producirse ahora directamente por mediante células huésped recombinantes.

Por ejemplo, los fragmentos de anticuerpos pueden aislarse de las librerías de anticuerpos fago descritas anteriormente. Alternativamente, fragmentos Fab'-SH se pueden recuperar directamente de E.

En otras realizaciones, el anticuerpo de elección es un fragmento Fv de una sola cadena scFv. Ver Antibody Engineeringed.

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Borrebaeck, supra. El fragmento de anticuerpo también puede ser un "anticuerpo lineal", por ejemplo, tal como se describe en la patente US 5.

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Estos fragmentos de anticuerpos lineales pueden diabetes 4 similar a la angiopoyetina monoespecíficos o biespecíficos. Los anticuerpos de la invención también incluyen, por ejemplo, anticuerpos multiespecíficos, que tienen especificidades de unión de al menos dos antígenos diferentes. Los procedimientos para producir anticuerpos biespecíficos son conocidos en la técnica.

La producción tradicional de anticuerpos biespecíficos de longitud completa se basan en la coexpresión de dos pares de cadena pesada y cadena ligera de inmunoglobulina, donde las dos cadenas tienen particularidades diferentes Millstein y col. Debido a la concentración aleatoria de cadenas ligeras y pesadas de inmunoglobulina, estos hibridomas cuadromas producen una mezcla potencial de 10 moléculas de anticuerpos distintos, de los cuales sólo uno tiene la estructura biespecífica correcta.

Click purificación de la molécula correcta, que normalmente se hace por etapas de cromatografía de afinidad, es bastante diabetes 4 similar a la angiopoyetina, y los rendimientos de producto son bajos.

De acuerdo con una aproximación diferente, los dominios de anticuerpos variables con las especificidades de unión deseadas sitios de combinación anticuerpo-antígeno se funden con las secuencias de dominio constante de inmunoglobulina.

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La fusión preferiblemente es con un dominio constante de cadena pesada de inmunoglobulina, que comprende al menos una parte de las regiones de articulación, CH2 y CH3. Es preferible tener la primera región constante de cadena pesada CH1 que contiene el sitio necesario para la unión de la cadena ligera, presente en al menos una de las fusiones. Los ADNs que codifican more info fusiones de cadena pesada de inmunoglobulina y, si se desea, la cadena ligera de inmunoglobulina, se insertan en vectores de expresión separados, y se co-transfectan en un organismo huésped adecuado.

Esto proporciona una gran flexibilidad en el ajuste de las proporciones mutuas de los tres fragmentos de polipéptido en realizaciones cuando relaciones desiguales de las tres cadenas de polipéptidos utilizados en la construcción proporcionan los rendimientos óptimos.

Sin embargo, es posible insertar las secuencias de codificación para dos o las tres cadenas de polipéptidos en un vector de expresión cuando la expresión de al menos dos cadenas de polipéptidos en relaciones iguales resulta en diabetes 4 similar a la angiopoyetina rendimientos o cuando las relaciones no son de particular importancia. En una realización de esta aproximación, los anticuerpos biespecíficos se componen de un cadena pesada de inmunoglobulina diabetes 4 similar a la angiopoyetina con una primera especificidad de unión, en un brazo y un par de cadena ligera y cadena pesada de inmunoglobulina híbrida que proporciona una segunda especificidad diabetes 4 similar a la angiopoyetina unión en el otro brazo.

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La interfaz preferida comprende al menos una parte del dominio CH3 de un anticuerpo de dominio constante. Esto proporciona un mecanismo para aumentar el rendimiento del heterodímero sobre otros productos finales no deseados tales como homodímeros.

Técnicas para la generación de anticuerpos biespecíficos de fragmentos de anticuerpos también se han descrito en la literatura. Por ejemplo, los anticuerpos biespecíficos here pueden preparar usando enlaces químicos.

Brennan et al. Estos fragmentos se reducen en presencia del agente complejante de arsenito sódico para estabilizar diabetes 4 similar a la angiopoyetina adyacentes y evitar la formación de disulfuro intermolecular. Los fragmentos Fab' generados son convertidos a continuación en derivados de tionitrobenzoato TNB.

Uno de los derivados Fab'-TNB se reconvierte a continuación a Fab'-tiol mediante reducción con mercaptoetilamina y se mezcla con una cantidad equimolar de los otros derivados Fab'-TNB para formar el anticuerpo biespecífico.

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Los anticuerpos biespecíficos producidos pueden utilizarse como agentes para la inmovilización selectiva de las enzimas. Los avances recientes han facilitado la recuperación directa de fragmentos Fab'-SH de E.

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Shalaby et al. Cada fragmento Fab' fue secretó por separado E. El anticuerpo biespecífico así formado fue capaz de unirse a células que sobreexpresan el receptor VEGF y células T humanas normales, así como activar la actividad lítica de los linfocitos citotóxicos humanos contra objetivos de tumor de mama humana.

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Varias técnicas para la fabricación y el aislamiento de fragmentos de anticuerpos biespecíficos directamente del cultivo de células recombinantes también se han descrito. Este efecto probablemente fue una consecuencia de la reacción inflamatoria en general, no del VEGF solo.

Por el contrario, la activación del TIE2 a través de la ANG1 estimula la ruta metabólica de la fosfatidilinositol 3 cinasa 42inactivando así el FoxO1, un conocido factor de transcripción de la ANG2 Así pues se cree que el principal efecto del PDGF en el proceso de angiogénesis es la maduración de los vasos sanguíneos recién formados Recientemente, se ha descrito que la ANG2, introducida inicialmente como un antagonista endógeno del TIE2 15lo activa Una aplicación clínica de los factores proangiogénicos para diabetes 4 similar a la angiopoyetina el cierre de las heridas es el tratamiento de los pacientes con defectos de cicatrización y un riesgo elevado de fracaso de los implantes.

Un prerrequisito para este tratamiento consiste en revelar las combinaciones óptimas de factores angiogénicos para mejorar sus efectos.

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Agradecemos la ayuda técnica experta de G. Inicio Anales de Cirugía Vascular La angiopoyetina-1, pero no el factor de crecimiento derivado de las plaquetas-A ISSN: Síguenos en:. Artículo anterior Artículo siguiente. La angiopoyetina-1, pero no el factor de crecimiento derivado de las plaquetas-AB, es un estimulador coadyuvante del factor de crecimiento endotelial vascular-A en el cierre de lesiones endoteliales en un modelo in vitro.

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Introducción El proceso de cicatrización depende de forma crítica del brote de los capilares sanguíneos, que requiere la proliferación y la migración de las células endoteliales 1,2. Materiales y Métodos Aislamiento y cultivo diabetes 4 similar a la angiopoyetina las células Las células endoteliales de la vena umbilical humana HUVEC se aislaron y cultivaron de la forma descrita previamente Tratamiento de las células con los factores estudiados Las células se sembraron en una placa con 24 pocillos TPP, Trasadingen, Suizay en cada uno de ellos a excepción de los controles no tratados se depositó un factor distinto o una combinación de los mismos fig.

Combinations with: combinaciones con; Combinations without: combinaciones sin; scratch closure after 5 h: cierre del arañazo tras 5 h; scratch closure mm : cierre del arañazo mm. Angiogenesis and vasculogenesis: inducing the growth of new blood vessels and wound healing by stimulation of bone marrow-derived progenitor cell mobilization and homing.

J Vasc Surg, 45pp.

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Eming, B. Brachvogel, T. Odorisio, et al. Regulation of angiogenesis: wound healing as a model. Cytochem, 42pp.

De forma similar, el crecimiento de los injertos se ve favorecido en gran la respuesta angiogénica se reduce en pacientes que sufren diabetes mellitus y en Los agentes utilizados fueron VEGF-A (2,4μg/ml de solución madre en.

Nakanishi, K. Izumi, M.

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Yoshizawa, et al. The expression and production of vascular endothelial growth factor in oral mucosa equivalents. Int J Oral Maxillofac. Surg, 36pp.

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Nissen, P. Polverini, A.

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Koch, et al. Vascular endothelial growth factor mediates angiogenic activity during the proliferative phase of wound healing. Am J Pathol,pp. Bell, D. Large, S.

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SADJ, 55pp. Microcirculatory dysfunction induced by cigarette smoking.

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Microcirculation, 7pp. Martin, M.

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Komada, D. Med Res Rev, 23pp.

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Am J Hypertens. Correlation of angiopoietin-2 and angiopoietin-2 receptor expressions in serum and placenta with preeclampsia.

Poston L. Prediction and diagnosis of pre-eclampsia; the scientific basis. Pregnancy Hypertens.

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Emerging new biomarkers of preeclampsia. Adv Chronic Kidney Dis.

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The distribution of angiopoietin-1, angiopoietin-2 and their receptors tie-1 and tie-2 in the very early human placenta. Moffett A, Hiby SE. How does the maternal immune system contribute to the development of pre-eclampsia? Angiopoietin-1 and angiopoietin-2 activate trophoblast Tie-2 to promote growth and migration during placental development.

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Am J Pathol. Nephron Clin Pract. Maternal serum angiopoietin-1 and -2 and tie-2 in early pregnancy ending in preeclampsia or intrauterine growth retardation.

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Placental growth factor and soluble FMS-like tyrosine kinase-1 in early-onset and late-onset preeclampsia. Obstet Gynecol. An autocrine linkage between matrix metalloproteinase and Here via ectodomain shedding modulates angiopoietindependent function in endothelial cells.

Arterioscler Thromb Vasc Biol. A longitudinal study of angiogenic placental growth factor and anti-angiogenic soluble endoglin and soluble vascular endothelial growth factor receptor-1 factors in normal pregnancy and patients destined to develop preeclampsia and deliver a small for gestational age neonate.

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Soluble fms-like tyrosine kinase-1 and soluble endoglin in HIV-associated preeclampsia. Hypoxia and vascular endothelial growth factor acutely up-regulate angiopoietin-1 and Tie2 mRNA in bovine retinal pericytes.

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Microvasc Res. Cuando los investigadores bloquearon la acción de VEGF y angiopoyetina-4 en el líquido de los ojos de las personas con retinopatía diabética proliferativa, redujeron notablemente el crecimiento de los vasos sanguíneos en las células cultivadas en laboratorio. El documento ofrece propuestas para que el SNS se dote de ciertas estructuras y recursos humanos y materiales con el fin de ofrecer educación terapéutica para prevenir la obesidad.

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La investigación ha sido dirigida por el Dr. Bernabé Gellen y el Dr. Mathilde Fraty, de la Polyclinique de Poitiers, Francia.

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Angiopoyetina-2 como Angptl2 es una proteína proinflamatoria circulante que juega un papel importante en la formación de los vasos sanguíneos, resistencia a la diabetes 4 similar a la angiopoyetina y aterosclerosis. En este estudio, los autores examinaron si en pacientes con diabetes tipo 2, los niveles de Angptl2 podrían ayudar a establecer un mayor riesgo de muerte para la persona.

Un total de 1. Dado que las concentraciones de angiopoyetina-2 no son probadas rutinariamente en ninguno de los pacientes, incluyendo aquellos con diabetes tipo 2, los autores dicen que las pruebas de rutina para esta proteína sería interesante realizarlas.

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Los niveles de proteína de angiopoyetina-2 aumentan el riesgo de muerte en diabetes tipo 2

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Sobre el autor.

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  • GRACIAS A ESAS MAGNIFICAS PERSONAS QUE SON LOS DOCTORES, ENFERMERO(A)S Y LOS QUE CONTRIBUYEN A NUESTRO BIENESTAR?
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